1. Šta obuhvataju nekliničke studije?
odgovor:Neklinički eksperimenti uključuju farmakološke studije, testove opće toksičnosti, toksikokinetičke i nekliničke farmakokinetičke eksperimente, testove reproduktivne toksičnosti, testove genotoksičnosti, kancerogenosti i druge testove (fototoksičnost, ovisnost, imunotoksičnost) itd. U slučajevima kombinirane terapije, može se provesti i neklinička ispitivanja sigurnosti kombinirane terapije. Za određene visoke proporcije (više od 10% ukupne sistemske izloženosti i nivo izloženosti u studijama na životinjama je niži od izloženosti kod ljudi), može biti potrebno provesti nekliničke studije sigurnosti metabolita.
2. Koja je svrha nekliničke procjene sigurnosti?
odgovor:Svrha nekliničke procjene sigurnosti općenito uključuje razjašnjavanje karakteristika reakcije toksičnosti koje se odnose na ciljne organe, ovisnost o dozi, odnos izloženosti i potencijalnu reverzibilnost. Ove informacije se mogu koristiti za procjenu sigurne početne doze i raspona doza za klinička ispitivanja na ljudima (kao što je ranije spomenuto, NOAEL treba dobiti u toksikološkim eksperimentima za izračunavanje MRSD-a, maksimalne preporučene početne doze) i za određivanje indikatora kliničkog praćenja potencijalnih nuspojava.
3. Koje su nekliničke studije potrebne za prva-u-ispitanjima na ljudima?
odgovor:Za ovo pitanje prvo je potrebno razjasniti vrstu lijeka. ICH M3 (R2) je primjenjiv na uobičajene situacije u razvoju lijekova i pruža opća načela smjernica. Za biološke lijekove treba provesti nekliničke studije u skladu sa zahtjevima ICH S6.
⑴Farmakokinetika:Prije podnošenja IND-a, dovoljni su podaci o metabolizmu ispitivanog proizvoda kod različitih vrsta i in vitro podaci o metabolizmu kod ljudi, kao i brzina vezivanja za proteine plazme. Informacije o apsorpciji, distribuciji, metabolizmu in vivo i izlučivanju trebale bi biti kompletirane prije velikih-kliničkih ispitivanja (obično faza 3). Eksperimenti apsorpcije PK općenito se provode na više vrsta prije podnošenja IND-a i određivanja PCC-a kako bi se bolje razumjele PK karakteristike lijeka u različitim vrstama, iako to ovdje nije potrebno, što je pomalo čudno.
⑵Sigurnosna farmakologija:Procjenu efekata na kardiovaskularni, centralni nervni i respiratorni sistem treba završiti prije podnošenja IND, što je kombinacija standardnih testova sigurnosne farmakologije. Dodatni sigurnosni farmakološki eksperimenti mogu se provesti tijekom kliničkih ispitivanja ako je potrebno.
⑶Toksičnost ponovljene doze:Općenito, kratkoročni-test hronične toksičnosti organiziran je na osnovu šeme ranog doziranja IND. Ako je potrebno kasnije produžiti period doziranja, potreban je dugotrajniji-test hronične toksičnosti kako bi se to podržalo.
⑷Genotoksičnost:Uz relativno nisku cijenu, kombinacija testova genotoksičnosti može se završiti prije podnošenja IND.
⑸karcinogenost:Ispitivanje karcinogenosti treba završiti prije odobrenja lijeka.
⑹Reproduktivna toksičnost:Zapažanja i evaluacije reproduktivnog sistema trebaju biti uključene u testove toksičnosti ponovljenih doza prije podnošenja IND radi preliminarne procjene reproduktivne toksičnosti, s tim da je stroga kontracepcija u kliničkim ispitivanjima dovoljna. Studije reproduktivne toksičnosti faze I/II treba završiti prije velikih-kliničkih ispitivanja, a studije reproduktivne toksičnosti faze III trebaju biti završene prije odobrenja.
⑺fototoksičnost:Procjenu fototoksičnosti treba završiti prije podnošenja IND. Ako je molarna apsorpcija veća od 1000 M-1cm-1, smatra se da postoji rizik od fototoksičnosti, a ispitivanje fototoksičnosti treba provesti prije velikih kliničkih ispitivanja.
4. Kako treba odrediti doze u toksikološkim testovima? Kako odabrati najveću dozu?
odgovor:Pozivajući se na "Tehničke smjernice za ispitivanje toksičnosti ponovljenih doza lijeka", "U principu, visoke doze trebale bi izazvati očite toksične reakcije kod životinja, niske doze bi trebale biti ekvivalentne ili veće od efektivne doze kod životinja ili kliničke upotrebe, a srednje doze treba postaviti između visokih doza i niskih doza na osnovu toksičnog mehanizma i odnosa doze prema toksičnosti."{0}
U praksi, s obzirom na skupe troškove toksikoloških testova, provođenje testa-pronalaženja raspona doza (DRF) sa nekoliko ne-primata je najisplativiji-najefikasniji i-najekonomičniji metod. Dozu za DRF testove takođe treba dodatno odrediti na osnovu preliminarnih studija bezbednosti sprovedenih tokom ranog određivanja PCC i farmakoloških studija. Mnoge institucije sada također provode testove akutne toksičnosti uz DRF testove, koji nisu-GLP testovi, kao što je spomenuto u M3 (R2), slijedeći 3R princip kako bi se smanjila upotreba životinja.
Za grupe sa niskim, srednjim i visokim dozama, obično se koristi razmak od 2-3 puta. U formalnim toksikološkim testovima, idealna situacija je da grupa s visokim dozama može pokazati očiglednu toksičnost, a grupe sa niskim ili srednjim dozama mogu se koristiti kao NOAEL.
Osim toga, za odabir najveće doze, M3 (R2) također daje standardne odgovore. Jednostavno rečeno, najveća doza u toksikologiji bi trebala biti ili maksimalna podnošljiva doza (MTD) ili maksimalna izvediva doza (MFD, koja se može shvatiti kao maksimalna doza koju životinje mogu tolerirati na osnovu karakteristika proizvoda i životinje), ili bi trebala postići zasićenje izloženosti, ili bi razina izloženosti trebala biti dovoljno visoka (dosegnuti 50 puta od predviđene kliničke doze). Općenito, 1000 mg/kg/dan se smatra dovoljnim osim ako predviđena klinička doza ne dosegne 1g/dan, a razina izloženosti od 1000 mg/kg ne dosegne 10 puta veći nivo kliničke izloženosti, u kom slučaju morate dodatno povećati dozu na 10 puta nivo kliničke izloženosti, ili 2000 mg/kg/dan, ili MFD.
5. Koje studije u nekliničkim istraživanjima sigurnosti moraju pratiti GLP, a koje ne?
odgovor:Farmakološke i farmakokinetičke studije ne moraju pratiti GLP, dok studije farmakologije sigurnosti, genotoksičnosti, reproduktivne toksičnosti i toksičnosti ponovljenih doza moraju pratiti GLP.
6. Koliko dugo traje neklinička ispitivanja toksičnosti ponovljenih doza?
odgovor:Zahtjevi za trajanje za podržavanje provođenja kliničkog ispitivanja i odobrenja tržišta su različiti i moraju biti specifični za period doziranja kliničkih ispitivanja. Na primjer, za pacijente s multiplom sklerozom, minimalni planirani period kliničkog ispitivanja je dvije godine. Stoga, kada se pacijenti s multiplom sklerozom upisuju u klinička ispitivanja, potrebna je studija hronične toksičnosti od 6-mjesečnih glodara i 9-ne-ne{9}}mjesečna studija hronične toksičnosti, što je dovoljno da podrži odobrenje tržišta. Za lijekove koji nisu{10}}onkološke, 4-nedjeljna studija hronične toksičnosti se općenito koristi da podrži period doziranja koji ne prelazi 4 sedmice za prva klinička ispitivanja na ljudima.
7. Kako odabrati eksperimentalne životinje za nekliničku procjenu sigurnosti?
odgovor:Općenito, koriste se dvije vrste životinja, glodari sa pacovima koji su preferirani izbor i ne-glodari sa psima Bigl koji su preferirani izbor. Naravno, treba se pridržavati i principa analize{2}}specifičnih proizvoda. Za male molekule, odabir vrsta treba uglavnom uzeti u obzir metaboličke karakteristike ispitivanog proizvoda kod životinja koje su slične ljudima. Može se uputiti na "Test analize i identifikacije metabolita ispitivanih proizvoda kod CD-1 miševa, SD pacova, pasa Beagle, Cynomolgus majmuna i mikrosoma ljudske jetre", odabirom vrsta sa metaboličkim karakteristikama sličnim ljudskim, odnosno vrstama sa sličnim količinama i tipovima metabolita kao kod ljudi. Osim toga, odabrana vrsta treba da bude osjetljiva na ispitivani proizvod. Na osnovu prethodnog iskustva, za lijek male molekule, njegove metaboličke karakteristike kod pasa Bigl mogu biti slične ljudima, ali s malom izloženošću.
